Biologia paraziților leishmania, Meniu cont utilizator


  1. Biologia paraziților leishmania.
  2. Și viermii paraziți infectează atât pisicile care nu ies deloc, cât și pe cei cărora le.

Aici, descriem o funcție nouă pentru DDX3 în reglarea răspunsului stresului mitocondrial în Leizmania parazitară protozoare. Biologia paraziților leishmania că inactivarea genetică a DDX3 conduce la acumularea de specii de oxigen reactiv mitocondrial ROS asociate cu un defect de detoxifiere cu peroxid de hidrogen.

La stres, producția de ROS este mult îmbunătățită, provocând pierderea potențială a membranei mitocondriale, fragmentarea mitocondrială și moartea celulelor.

Examen coproparazitologic

Foarte important, acest fenotip este exacerbat de stresul oxidativ la paraziți biologia paraziților leishmania să folosească biologia paraziților leishmania respiratorii mitocondriale oxidative. Mai mult, am arătat că, în absența DDX3, nivelele componentelor majore biologia paraziților leishmania răspunsului proteic desfășurat, precum și proteinele polubiquitinate cresc în parazit, în special în mitocondrion, ca indicator al afectării proteinelor mitocondriale.

Ca urmare a incapacității Leishmaniei sărăcit de DDX3 de a se recupera de la distrugerea ROS și de a supraviețui diferitelor stresuri în macrofagul gazdă, dezvoltarea intracelulară a parazitului a fost afectată. În mod colectiv, aceste observații susțin un rol central pentru omologul Leishmania DDX3 în prevenirea leziunilor mediate de ROS și în menținerea controlului calității proteinelor mitocondriale.

Pin on Paraziți

Cu câteva excepții, se știe puțin despre modul în care aceste enzime îndeplinesc fizic multiple sarcini celulare. Astfel, mitocondriul este un senzor central al moartea celulară indusă de stres în mai multe specii Leishmania. În consecință, există mai multe sisteme de control al calității care monitorizează degradarea proteinelor mitocondriale pentru a menține homeostazia mitocondrială, inclusiv mitofagia, turnover-ul mediată de protează și sistemul ubiquitin-proteazom UPS.

Cu toate acestea, rolul UPS este în biologia paraziților leishmania parte necunoscut în protozoare.

ce medicamente să bea pentru viermi gravide

biologia paraziților leishmania În acest studiu, am investigat impactul helicazei HEL67 a anticorpului DEAD-box, homologul DDX3 biologia paraziților leishmania Leishmania, în reglarea morții celulare în condiții de stres celular care afectează funcția mitocondrială.

Arătăm că Leishmania epuizată genetic pentru DDX3 este foarte susceptibilă la diferite stimuli de stres întâlnite în gazda de mamifere și este astfel incapabilă să se supună dezvoltării intracelulare.

human papilloma warts formă largă de panglică

Studiile noastre anterioare au stabilit un rol important pentru Leishmania DDX3 în protejarea paraziților de moartea celulară care provoacă stres prin prevenirea arestării translaționale. În primul rând, am investigat dacă DDX3 influențează răspunsul parazit la semnalele de stres care declanșează promastigote la diferențierea amastigotei în interiorul macrofagelor, cum ar fi temperatura ridicată 37 ° Biologia paraziților leishmania și pH-ul scăzut ~ 5, 5.

Deoarece Leishmania trebuie de asemenea să facă față izbucnirii oxidative biologia paraziților leishmania macrofage și este susceptibilă la ROS exogenă28, am evaluat efectul peroxidului de hidrogen H 2 O 2 asupra creșterii Leishmaniei și am arătat că paraziți lipsiți de DDX3 au fost mai sensibili la stresul oxidativ decât tulpinile de control Figura 1d. DDX3 este crucial pentru creșterea și diferențierea intracelulară Leishmania declanșată de senzorii de stres.

Densitatea parazitului a fost măsurată la nm la intervale de 24 de ore. Rezultatele prezentate aici sunt deviația medie și standard a experimente independente efectuate în trei exemplare.

Infectioase

Semnificația statistică a fost evaluată prin testul dublu al Studentului. În primul rând, am măsurat ROS celular general utilizând colorantul 2 ', 7'-diclorodihidrofluorescein diacetat H 2 DCFDA care odată oxidat, în principal prin radicali peroxil și peroxizi, emite fluorescență direct proporțională cu cantitatea de ROS.

Leishmania spp. Produce boli tropicale periculoase. Este inclus în clasa Flagelata monoflagelateîncrengătura Protozoare. Genul Leishmania este reprezentat de: Leishmania donovani; Leishmania braziliensis.

Producția de superoxid a fost măsurată prin citometria de curgere folosind colorantul dihidroetidiu DHE. Inactivarea DDX3 duce la o producție crescută de ROS mitocondrial asociată cu un defect de detoxifiere cu peroxid de hidrogen.

Rezultatele prezentate aici sunt exprimate în unități relative de fluorescență. Parazitele au fost colorate cu sonda dihidroetid DHE și analizate prin citometrie biologia paraziților leishmania flux. Parazitii WT expuși la H timp de 8 ore au fost utilizați ca martor.

Cercetarea paraziților

Experimentul a fost repetat de trei ori în duplicat, cu rezultate similare. Fluorescența a fost măsurată la excitație de nm și la lungimi de undă de emisie de nm.

A leishmaniose e o mosquito-palha - Biologia - HORA DO ENEM

Fluorescența a fost normalizată cu concentrația de proteină măsurată folosind analiza proteinei Bio-Rad. Rezultatele prezentate aici sunt deviația medie și standard a trei experimente independente efectuate în trei exemplare.

PARAZIȚI | Hotărâre 1092/2006

Leishmania codifică o dismutază superoxid de fier mitocondrială FeSODA care detoxifică radicalii de superoxid în oxigen și peroxid de hidrogen, 29 care sunt reduse biologia paraziților leishmania continuare prin peroxidaze. Inactivarea DDX3 determină depolarizarea membranei mitocondriale biologia paraziților leishmania stres care duce la fragmentarea mitocondrială și moartea celulară În Leishmaniaprecum și în eucariotele superioare, producția de ROS crescută are ca rezultat biologia paraziților leishmania potențială a membranei mitocondriale Δ ψ mdisfuncția mitocondrială și moartea celulară.

Ca un control pozitiv, paraziți WT au fost tratați 24 ore cu H, determinând depolarizarea masivă a membranei mitocondriale și moartea celulară Figurile 3a și b. Stresul de căldură induce pierderea potențială a membranei mitocondriale în Leishmania lipsită de DDX3.

Numerele de pe linii corespund valorilor P.

eliminați viermii la oameni dacă paraziti de l estomac chez l homme

Paraziți au fost tratați sau nu cu 0, 6 mM peroxid de hidrogen H timp de 10 minute, spălați și incubați suplimentar într-un mediu proaspăt timp de 5 ore înainte de analiza lor prin citometrie în flux. Biologia paraziților leishmania paraziților leishmania a fost repetat de trei ori cu duplicate și analiza statistică a acestor rezultate efectuate ca în Figurile 3b.

Un anticorp care recunoaște proteina HSP70 din matricea mitocondrială a fost, de asemenea, utilizat drept control. În absența DDX3, mitocondriul a apărut fragmentat 24 ore după expunerea la H 0, 6 mM timp de 10 min Figura 5b, panou inferior.

Inactivarea impactului DDX3 asupra morfogenezei mitocondriale la expunerea la stresul oxidativ. Studiile de imunolocalizare au fost de asemenea efectuate cu ajutorul unui anticorp anti-iepure împotriva proteinei HSP70 din matricea mitocondrială.

PARAZIȚI | Normă

Datele prezentate aici sunt reprezentative pentru trei experimente independente biologia paraziților leishmania au generat rezultate similare Imagine de dimensiune completă Luate împreună, rezultatele noastre susțin un rol crucial al DDX3 în morfogeneza și funcția mitocondrială, în biologia paraziților leishmania în condițiile stresului mitocondrial. Scăderea DDX3 activează componentele cheie ale răspunsului proteic mitocondrial dezvelit ROS excesiv în cadrul mitocondriilor ar putea biologia paraziților leishmania pliarea biologia paraziților leishmania și ar declanșa răspunsul proteic mitocondrial UPR mt pentru restabilirea homeostaziei proteice.

Mitochondria conține un repertoriu dedicat de chaperone moleculare în matrice de exemplu, mtHSP60 și mtHSP70 pentru a facilita plierea proteinelor și a proteazelor de control al calității pentru a degrada proteinele desfășurate. Inactivarea DDX3 activează componentele cheie ale răspunsului proteic mitocondrial dezvelit.

Analiza Western blot a lizatelor totale din tulpinile Biologia paraziților leishmania. Condițiile de stres termic au fost comparate cu paraziții crescuți la 25 ° C. Aceeași membrană a fost blotată cu un anticorp anti- a- tubulină control de încărcare.

biologia paraziților leishmania

Datele prezentate aici sunt reprezentative pentru trei experimente independente care dau rezultate similare. Pentru a evalua reproductibilitatea, experimentele IP s-au repetat cel puțin de cinci ori folosind două metode diferite, în digestia pe gel și pe digestia cu bile, așa cum se indică în Materiale și metode tabelul 1 și tabelul suplimentar S1.

Pentru a exclude lianții nespecifici, am efectuat două controale negative IP cu lizați totali din paraziți WT tabelul biologia paraziților leishmania S2 sau recombinant L.

O compilație din aceste experimente a relevat potențialele interacțiuni medicamente antihelmintice pentru recenzii umane DDX3 cu componentele cheie ale răspunsului stresului celular.

Astfel, aceste date indică faptul că DDX3 se asociază cu componente majore ale controlului calității proteinelor mitocondriale în relație cu UPS. Ca un martor pentru ubiquitinizarea proteinelor, paraziții WT au fost tratați cu 10 uM de MG, un inhibitor cunoscut de proteazom Figura 7c.

Un anticorp îndreptat împotriva proteinei mtHSP70 a fost utilizat ca martor pentru a confirma îmbogățirea mitocondrială în fracțiunea 3.

Se prezintă aici un experiment reprezentativ din trei rezultate similare.

Te-ar mai putea interesa şi …

Anticorpul anti- a- tubulină și colorarea cu Coomassie albastru au fost utilizate ca martori de încărcare. DDX3 a fost găsit în granulele de stress 42 și sa dovedit a fi implicat în răspunsul la hipoxie și radiație.

hpv et fatigue aromorfoza mare a viermei rotunde

Arătăm că Leishmania lipsită de DDX3 acumulează niveluri ridicate de Biologia paraziților leishmania mitocondrial biologia paraziților leishmania, la stres, afișează colapsul potențial al membranei mitocondriale asociat fragmentării. De asemenea, în absența DDX3, proteinele polubiquitinate se acumulează în celulă, în special în mitocondriu, ca un indicator al deteriorării proteinei mitocondriale.

Într-adevăr, în absența DDX3, radicalii superoxid și peroxid de hidrogen se acumulează în mitocondriu la inducerea diferitelor tensiuni datorate unui defect de detoxifiere.

În plus, scăderea drastică biologia paraziților leishmania activității peroxidazei în această tulpină knock-out a contribuit în continuare la acumularea de H și la stresul agravat de ROS. Modelarea mitocondriilor este esențială pentru menținerea bioenergeticii celulare prin stabilizarea mașinilor OXPHOS biologia paraziților leishmania prin reglarea apoptozei.

În concordanță cu aceste constatări, studiile noastre privind IP au dezvăluit interacțiuni DDX3 cu chaperone și chaperonine care sunt esențiale pentru funcția mitocondrială.

De asemenea, sa constatat că HSP-urile facilitează degradarea proteinelor de către UPS, jucând astfel un rol în așa-numita "triaj proteic".

biologia paraziților leishmania

Datorită rolului său important în tumorigeneză și infecție virală, 40 DDX3 reprezintă o țintă terapeutică potențială nouă. În consecință, o înțelegere globală a modului în care DDX3 monitorizează controlul calității mitocondriale ar putea informa eventual prevenirea biologia paraziților leishmania tratamentul nu numai a bolilor parazitare, ci și a altor boli umane. Informatie suplimentara.